Immunophénotypage : technique et applications en biologie

Cette technologie, utilisée principalement pour caractériser les leucocytes, a de nombreuses applications en biologie médicale : en immunologie (étude des lymphocytes sanguins, allergologie), en hématologie maligne (diagnostic et suivi des leucémies, lymphomes) et non maligne. D’autres applications se développent également en bactériologie, pharmacologie, etc

Les antigènes exprimés par une cellule (nomenclature des « CD » : Cluster of Differentiation) permettent d’identifier sa lignée, son caractère normal ou pathologique, son degré d’immaturité, d’activation, etc
Des anticorps monoclonaux ont été développés contre ces diverses structures cellulaires et couplés à des fluorochromes.

La cytométrie en flux repose ainsi sur une réaction d’immunofluorescence directe, qui grâce aux technologies fluidique, optique et informatique mises en œuvre dans les cytomètres, peut être appliquée à des centaines de milliers de cellules en un temps court. Le grand avantage de cette technologie est son caractère multiparamétrique. En effet, les cytomètres de routine permettent aujourd’hui l’utilisation combinée de jusqu’à 10 anticorps couplés à des fluorochromes différents. La quantité d’informations recueillies pour chacune des cellules analysées permet ainsi une analyse toujours fine et précise des populations cellulaires d’intérêt.

Pour en savoir plus

• Plus d’informations dans le Focus 43
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